管理员 2007-9-26 14:16
141-4-操作程序
自体HSCT程序包括干细胞动员、采集、CD34+细胞分选、干细胞冻存、预处理及去髓后造血干细胞回输。
一、千细胞动员、采集、分选及冻存
自体干细胞可来源于骨髓或外周血，以后者更常用。造血干细胞可循环于外周血液，但数量非常少。造血生长因子的使用、分离干细胞的技术以及应用化疗后观察到的干细胞募集于外周血，促成了外周血干细胞移植(PBSCT)的成功。在采集外周血干/祖细胞前使用化疗或造血生长因子称为动员。联合使用环磷酞胺(2-4g/mz)与粒细胞集落刺激因子是用动员干细胞的最常用方案。化疗10一12天后外周血细胞计数开始上升，此时可以连续采集造血干细胞。多数情况下，进行一或两次采集即能获得足够数量的干细胞(大约2 x 106CD34+细胞/kg)。应用 C1iniNIACS细胞分选仪进行CD34+细胞分选，为保证回输后顺利的造血及免疫重建，一般要求分选后CD34十细胞数>2x1护/kg。将所得干细胞成分冻存以备回输。
二、入层流病房的准备
患者的大剂量免疫抑制治疗(预处理)及干细胞回输需在无菌层流病房进行。人层流病房前1周开始全面检查并开始无菌处理。检查重点在于各种病毒学指标的评价(乙肝、丙肝、风疹、CMV, EB, HSV)以及咽、鼻、外耳道、皮肤、肛周等拭子的细菌培养。无菌处理包括微波炉灭菌饮食，口服庆大霉素8万单位每日两次、氟呱酸0.2g每日三次、氟康哇0.2g每日一次、TMPcO 1片每日两次，以及庆大霉素眼药水滴眼、金霉素眼药膏滴鼻、1:2000洗必泰液漱口及坐浴等，人层流室前还需12000洗必泰液药浴30分钟，以保证患者全身相对无菌状态，预防大剂量免疫抑制治疗后血WBC降为零时机会性感染的发生。
三、预处理
预处理的目的是最大限度地去除异常细胞，所采用的剂量可达到去髓但能被非造血器官所耐受。最常用于自体和异基因HSCT的去髓预处理方案包括联合使用环磷酞胺(CTX,200mg/kg)和TBI或CTX + ATG.由于环磷酞胺具有强大免疫抑制的特点，其在所有的异基因HSCT预处理方案中都需使用。常见的动员及预处理方案见表141一3。
四、干细胞回输
将冻存的造血干细胞在37℃水浴下快速复温,10-30分钟内快速回输人体内。回输时应行心电监护，同时预防性应用抗生素、糖皮质激素以及碳酸氢钠，注意有无溶血、过敏等反应发生。回输后+1天始予丙种球蛋白5-- log/d，连用5天以预防感染，如临床上有感染迹象时应积极给予抗生素治疗。一在报道的接受自体HSCT的自身免疫病患者中，般在预处理 1周左右会发生骨髓衰竭，即外周血WBC降为零，此时予G-CSF 5ug/(kg " d )以协助造血重建;当血小板降至20 x 10'/L，尤其是临床上有出血倾向时，应输注单采血小板支持。当外周血中性粒细胞 (ANC)连续3天>1.0 x 1护/L、血小板计数连续3天>20 x 109/L时提示造血重建完成，可停用 G-CSF及单采血小板，其中ANC的恢复时间定义为3天中的第1天，血小板恢复时间定义为 3天中的第 3天。在ANC稳定在 2.0 x 109 /L以上时可转出层流室。
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